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产品说明：
Biorab植物RNA快速提取试剂盒适用于绝大多数植物(包含多糖多酚复杂植物样本)RNA提取，可以简单快速地从各种来源的植物组织中纯化高质量的总RNA。纯化好的总RNA可用于mRNA分离，RT-PCR，Northern杂交等下游分子实验。
操作步骤：(样品裂解，样品纯化，RNA收集)
离心条件均优先选择4℃，室温离心也可以。
一：样品裂解
液氮研磨法
取1mL裂解液加入1.5mL离心管中。将100mg植物种子用液氮研磨成粉末，将其转移到含有裂解液的离心管中，立即剧烈振荡20秒后用枪头吹打混匀或涡旋震荡使样本充分裂解。
注意：低温可能导致裂解液有白色悬浮物，请置于65℃水浴充分溶解后使用。裂解液含巯基乙醇，请于通风橱内操作。
二：样品纯化
1.将裂解物12000rpm离心2～3min，吸取上清1mL到1.5mL离心管。
2.在上清中加入0.3mL的RNA纯化液和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒，溶液呈均匀的乳浊状。
注意：如样品简单，此步可省略。具体操作为：吸取上清1mL，继续12000rpm
离心10min，取上清后接步骤(二，4)加等体积RNA结合液，上纯化柱。
3.12000rpm离心3～5min，取上清到新的1.5mL离心管中(避免触及分层界面，下层会有大量DNA和蛋白污染，避免污染。)
4.上清中加入等体积的RNA结合液，颠倒混匀，分两次加入同一个RNA纯化柱中(如有絮状物或沉淀产生，一并加入纯化柱中)。12000rpm离心1min，弃穿透液。
5.如需去除DNA污染，参照步骤(四)可选步骤，用DNase I处理。如DNA不干扰后续实验请接下步。
6.在纯化柱中加入0.5mL RNA洗涤液，室温12000rpm离心半分钟，弃穿透液。重复洗涤一次。(洗涤液使用后拧紧瓶盖，防止挥发)
三：RNA收集
1.将结合有RNA的纯化柱12000rpm离心1min，甩干乙醇。(乙醇的残留将会降低洗脱效果和影响下游实验，或者适当延长离心时间，将有助于乙醇的去除)
2.弃收集管，将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中(自备)，加入30-50μLRNA溶解液，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟洗脱RNA。得到的RNA可直接用于后续实验或者-80℃存放。
3.如果要提高RNA产量，加入30-50μLRNA溶解液重复洗脱一次，合并两次穿透液；如果要提高RNA浓度，使用第一次的洗脱液加回到吸附柱中重复洗脱。
注意：建议RNA用于下游实验之前，先进行质量检测。经变性琼脂糖凝胶电泳后，会有清晰的28S和18S条带，以及中间弥散的mRNA条带，其中28S条带是18S条带亮度的1.5～2倍。有时还包括跑在最前面的较暗的5S条带。如果条带不清晰或者弥散，可能是提取过程中或者材料保存过程中RNA发生了降解。小于200bp的RNA分子不能有效结合到吸附柱上。A260/A280比值1.8~2.0对应RNA纯度90～100%之间。
四.DNA清除(可选步骤)
1.接样品纯化步骤(二，5)。
DNase I工作液配置：98μL DNase I反应液+2μLDNase I溶液。
2.将DNase工作液在37℃预热30 s，然后全部加入到RNA纯化柱中，室温放置2分钟。
3.12,000rmp/min离心1min。然后在穿透液中加入300μL的RNA结合液，混匀后，重新加入此吸附柱中。
4.静置2min后，12,000rmp/min离心1min，弃穿透液。
5.在纯化柱中加入0.5mL RNA洗涤液，室温12000rpm离心半分钟，弃穿透液。重复洗涤一次。(洗涤液使用后拧紧瓶盖，防止挥发)。
6.接RNA收集步骤(三)。
相关搜索：植物种子RNA提取试剂盒，Plant seed RNA Extraction Kit